293细胞无血清培养基,解锁细胞培养无忧秘籍!-技术前沿-资讯-生物在线

293细胞无血清培养基,解锁细胞培养无忧秘籍!

作者:翌圣生物科技(上海)股份有限公司 2024-10-16T00:00 (访问量:21678)

细胞培养作为现代生命科学研究的重要手段之一,为我们深入探索生命的奥秘提供了有力的工具。通过在体外模拟体内环境,让细胞在适宜的条件下生长、增殖和分化,可以研究细胞的生理功能、疾病发生机制以及开发新的治疗方法。然而,要实现高质量的细胞培养并非易事,培养基的选择至关重要。

 

含血清培养基

 

在传统的细胞培养中,含血清培养基被广泛使用。血清中含有丰富的营养成分和生长因子,能够支持细胞的生长和增殖。然而,血清培养也存在诸多缺点。

 

 01 血清的成分复杂且不明确,不同批次之间存在差异;02 血清可能携带病毒、支原体等潜在污染物,增加了细胞培养被污染的风险;03 在蛋白表达纯化等一些实验中,血清中的成分可能会干扰实验结果。

 

 

无血清培养基

无血清培养基是指在细胞培养过程中不添加血清,而是通过精确调配各种营养成分、生长因子和其他添加剂来满足细胞生长需求的培养基。从最初的尝试到如今的广泛应用,无血清培养基经历了多年的发展和完善,逐渐成为细胞培养的主流选择之一,它具有以下显著优点:

 

 01 成分精准可控

无血清培养基的成分经过科学调配,明确且稳定。每一种成分的作用都清晰可辨,确保了实验结果的高度可重复性。这对于需要严格控制实验条件的研究和生产过程至关重要;

02 杜绝污染风险由于不含有血清,极大地降低了潜在的污染风险,为细胞培养提供了一个纯净、安全的环境;03 优化细胞生长

针对不同类型的细胞,如293细胞,无血清培养基能够提供特定的营养成分和生长因子组合,促进细胞快速增殖并维持良好的细胞状态。

 

 

产品介绍

 

CelCulSF™293 Cell Culture Medium(Serum-free)培养基为无动物源、无蛋白的完全化学成分限定培养基。适应于HEK293各细胞系细胞(如HEK293F,HEK293T,HEK293H,Expi293 等)规模化无血清悬浮培养及后续转染表达。产品经过定向优化,尤其适应于AAV及蛋白等相关产品研发和生产过程,可支持细胞高密度扩增及稳定的产物表达。

 

 

使用秘籍

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技术参数

 

参数

设定值

50mL TPP管

培养体积:10-20 mL

125~1000 mL摇瓶

培养体积:摇瓶总体积的20-30%

摇床转速

TPP:转速220 rpm,  摇瓶 110-130 rpm

摇床振幅

50 mm

培养基

CelCulSF293 Cell Culture Medium(Serum-free)

接种密度

0.5×106 cells/mL

培养温度

37℃

CO2%

5%

相对湿度

80%RH

 

// 

细胞驯化

 

通常,在原用培养基中生长的HEK293细胞需要转移到由50%原用培养基和50%培养(CelCulSF™ 293 Cell Culture Medium)组成的新培养基中进行适应性生长。

 

 01 

将原用培养基中生长的细胞移入新培养基(50% CelCulSF™293 Cell Culture Medium + 50% 原用培养基 ),接种密度为0.5×106/mL。

02 细胞培养至48±3小时后,建议按此方法进行至少3次细胞适应性传代。当细胞活率高于90%时转入100% CelCulSF™ 293 Cell Culture Medium培养基培养。

 

// 

细胞培养

01 37℃水浴中预热CelCulSF™ 293 Cell Culture Medium培养基;

02 接种密度为1.0×106 viable cells/mL。培养 48±3 小时后,取0.5mL细胞悬液,用细胞计数仪分析活细胞密度(×106细胞 /mL)和活细胞(%);

03 传代前,如果细胞密度低于2.0 ×106/mL,或细胞活率低于80%,需要150g - 300g,离心5分钟处理细胞。轻轻弃上清,使用100%新鲜培养基按0 .5×106/mL重悬细胞;

04 如果传代前细胞密度大于2.0×106/mL且活细胞率高于85%,则将适量的细胞悬液转移到新摇瓶(或TPP管)中,并用新鲜培养基直接调整最终培养体积进行细胞传代,然后在规定的环境条件下培养细胞;

05 如果传代比(传代后的种子密度:传代前的细胞密度)大于1:4,细胞需要离心并重新悬浮在100%新鲜培养基中。

 

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蛋白表达,腺相关病毒病毒等在悬浮293细胞上的表达

01 细胞在CelCulSF™ 293 Cell Culture Medium 中培养;

02 72±3 小时后,取 0.5 mL细胞悬液,用细胞计数仪分析活细胞密度(×106/mL)和细胞活率(%);03 用相同体积的预热培养基稀释培养物(培养物体积:待添加培养基体积=1:1);04 根据病毒培养工艺,接种病毒,并继续培养病毒至收获。可根据实际生产工艺进行优化或联系产品相关负责人。

 

 

 

FAQ

  

293 无血清培养基可以用于哪些细胞类型?

主要适用于293细胞系,包括HEK293F,HEK293T,HEK293H,Expi293等不同亚型的细胞。

 

 

与传统含血清培养基相比,无血清培养基有哪些优势?

无血清培养基具有以下优势:成分明确且稳定,避免血清批次差异带来的影响;降低潜在的污染风险;简化实验操作流程;优化细胞生长,满足不同实验需求;具有更高的成本效益。

 

 

如何判断 293 细胞在无血清培养基中的生长状态是否良好?

可以从以下几个方面判断:细胞形态正常;细胞增殖速度稳定;培养基颜色变化正常,未出现浑浊等异常现象。

 

 

无血清培养基的保存条件是什么?

建议将293无血清培养基保存在2 - 8℃冰箱中,避免光照和高温。开封后应尽快使用,避免长时间存放。

 

 

在使用无血清培养基过程中,如果出现细胞生长不良怎么办?

首先检查培养条件是否符合要求,如温度、CO2、浓度等。可以适当调整细胞接种密度、换液频率等。如果问题仍然存在,可以联系Yeasen技术支持团队,寻求专业的解决方案。

 

选择 Yeasen 293无血清培养基,让你的细胞培养之路更加顺畅无忧!

 

 

订购信息

 

产品名称

产品货号

规格

CelCulSF™ 293 Cell Culture Medium(Serum-free) 293细胞无血清培养基

40141ES80

1000 mL

CelCulSF™ Insect Cell Culture Medium(Serum-free) 昆虫细胞无血清培养基

40140ES80

1000 mL

CelCulSF™ Hybridoma Cell Culture Medium(Serum-free) 杂交瘤细胞无血清培养基

40143ES80

1000 mL

Serum-Free CellStore Freezing 无血清细胞冻存液
(推荐搭配使用无血清冻存液,效果更佳)

40151ES50

50 mL

40151ES60

100 mL

 

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