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知识讲解:关于培养皿使用中的5大常见问题

作者:元素商城 2019-06-13T14:51 (访问量:8126)

培养皿一般由一个平面圆盘状的底和一个盖组成,是培养微生物或细胞培养的常用实验耗材,培养皿按照材质可分为塑料和玻璃两种。通常玻璃的可以用于植物材料、微生物培养和动物细胞的贴壁培养也可能用到。塑料的可能是聚乙烯材料的,适合实验室接种、划线、分离细菌的操作,可以用于植物材料的培养。培养皿易碎,在清洗和使用时要小心轻拿轻放,使用完后要及时清洗干净,存放在安全、固定的位置。

一、培养皿如何清洗

一般经过浸泡、刷洗、浸酸、和清洗四个步骤。

1、浸泡:新的或用过的玻璃器皿要先用清水浸泡,软化和溶解附着物。新玻璃器皿使用前得先用自来水简单刷洗,然后用5%盐酸浸泡过夜;用过的玻璃器皿往往附有大量蛋白质和油脂,干涸后不易刷洗掉,故用后应立即浸入清水中备刷洗。

2、刷洗:将浸泡后的玻璃器皿放到洗涤剂水中,用软毛刷反复刷洗。不要留死角,并防止破坏器皿表面的光洁度。将刷洗干净的玻璃器皿洗净、晾干,备浸酸。

3、浸酸:浸酸是将上述器皿浸泡到清洁液中,又称酸液,通过酸液的强氧化作用清除器皿表面的可能残留物质。浸酸不应少于六小时,一般过夜或更长。放取器皿要小心。

4、冲洗:刷洗和浸酸后的器皿都必须用水充分冲洗,浸酸后器皿是否冲洗的干净,直接影响到细胞培养的成败。手工洗涤浸酸后的器皿,每件器皿至少要反复“注水-倒空”15次以上,最后用重蒸水浸洗2-3次,晾干或烘干后包装备用。

二、培养皿为什么要倒置培养

1、由于重力的作用使培养基表面及次层能富集微生物生长所需的营养物质,利于微生物生长;

2、防止空气中微生物的污染培养基及培养物:倒置时平板内的空气是不流动的,杂菌不会沉降到培养基表面,如果不倒置,很快平板周边会长起杂菌。

3、倒置培养使琼脂里水分不易蒸发出去,而充分的保持琼脂的弹性与细菌容易繁殖和生存的环境。如果不倒置,大概3天左右培养基就会出现龟裂等水分散失的情况。 而一些落菌等试验,需验证培养基无菌,就要先倒置培养48小时才可作为模板做落菌,水分散失是很重要的。

三、培养皿规格有哪些

培养皿规格直径一般是90mm,当然不同的生产厂家生产的培养皿规格也会不同,下面就重点说下元素商城旗下的品牌洁特和耐思。比如JET细胞培养皿可提供7种规格,TC处理、未TC处理和CellATTACH® 超亲水表面,可做称量、分离和处理组织或细胞等多种实验中的暂放和储存容器使用。而耐思品牌的培养皿规格有4种分别为35mm、60mm 、100mm 、150mm。

四、培养皿与培养瓶的区别

培养瓶适合长期培养、传代、作为种子细胞。 不易污染。

培养皿和培养板适合在各种实验中选用,临时培养。

培养面积T25约为25,T75为75。6孔板、10/孔。12孔板4/孔。

培养瓶和培养皿的区别在于,安全系数的高低、培养细胞数量的多少。个人感觉培养瓶的安全系数更高,操作也比较方便。培养瓶瓶可以用来做相对大规模的培养或比较容易被污染的细胞。而培养皿比较适合小规模的培养或做一些对照分析实验。

五、使用培养皿需要注意什么

1、使用前经过清洁消毒,培养皿清洁与否对工作影响较大,可影响培养基的酸碱度,若有某些化学药品的存在,会抑制细菌生长。

2、新购的培养皿应先用热水冲洗,再置于质量分数为1%或2%的盐酸溶液中浸泡数小时,使游离碱性物质除去,再用蒸馏水冲洗2次。

3、若要培养细菌,再用高压蒸气(一般6.8*10的5次方Pa高压蒸气),120℃的温度下30min灭菌,置室温中干燥,或用干热灭菌,就是将培养皿置于烘箱内,温度控制在120℃左右的情况下维持2h,即可杀死细菌的胞牙。

4、经过消毒的培养皿才能接种培养使用。

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