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链霉亲和素(SA)简述：
链霉亲和素(SA)是Streptomyces avidinii菌的分泌物，其分子量及结合生物素的能力与鸡蛋清中的亲和素相似，等电点6.0，非特异性结合远比亲和素低。
链霉亲和素(SA)的来源：
SA 是Streptomyces avicllrdi菌培养过程中的分泌产物，主要通过2一亚氨基生物索亲和层析法提纯，1L培养液中含蛋白10~60mg。链霉亲和素是四聚体蛋白，大小为66KDa。一分子链霉亲和素可以高度特异性地与四分子生物素结合，两者之间的亲和力极为强烈。
链霉亲和素(SA)的应用：
enzyme immunoassays, 酶免疫测定
immunohistochemistry, 免疫组织化学
flow cytometry, 流式细胞仪
Western blot, 原位杂交
immunoblotting procedures免疫印迹程序
Western blot免疫印迹
链霉亲和素(SA)的荧光标记物及激发波长：
|
荧光染料 |
颜色 |
Ex（nm） |
Em（nm） |
|
FITC |
绿色 |
490 |
525 |
|
TRITC |
黄色 |
547 |
572 |
|
Cy3 |
黄色 |
555 |
570 |
|
Cy5 |
红色 |
646 |
620 |
|
Cy7 |
深红色 |
750 |
773 |
荧光标记的链霉亲和素(SA)的介绍：
FITC-Streptavidin：
FITC是广泛使用的荧光基团，但其最大的缺点是淬灭快，使用抗淬灭剂可以减轻。
花青染料（Cy2,Cy3,Cy5,Cy7-Streptavidin）：
Cy2比FITC更稳定，且在表面荧光显微镜下，Cy2的荧光FITC更强。Cy3和Cy5比大多数荧光基团更亮，更稳定，背景更弱。二者常在共聚焦显微实验中作多标记。但Cy5的缺点是不能用表面荧光显微镜观察，因此通常用具有远红外检测器的共聚焦显微镜观察。
TRITC-Streptavidin:
TRITC,RRX,TR:TRITC经常和FITC一起用于双标记实验中，也可以使用RRX或TR，但TR会产生较高的背景。在使用装有氪氢灯的激光共聚焦扫描显微镜作三标记实验时，RRX尤其有用，可以和Cy2（或FITC）及Cy5一起使用，因为RRX的发射波长在Cy2和Cy5中间，且和这两者的重叠很少。
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