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[我司产品or服务]-帕金森动物模型构建服务

作者:武汉枢密脑科学技术有限公司 2022-07-19T14:49 (访问量:3031)

疾病机理
       帕金森病(Parkinson’s disease, PD)又名震颤麻痹,是一种常见的中老年人神经系统变性疾病。主要病变在黑质和纹状体。震颤、肌强直及运动减少是本病的主要临床特征。帕金森病是老年人中第四位最常见的神经变性疾病。PD疾病形成的主要标志是多巴胺能神经细胞(DAG细胞)的损伤和路易小体的形成。

造模方法
       通过病毒载体在黑质过表达α-Synuclein造PD模型(我司开发
       α-突触核蛋白(a-Synuclein)是一种在中枢神经系统突触前及核周表达的可溶性蛋白质,它与帕金森病的发病机制和功能障碍密切相关,是路易小体的主要组成部分。应用脑立体定位技术向大鼠中脑黑质区分别注入携带α-synuclein野生型(WT)与突变型(1,2)序列的rAAV9X型病毒,并在相应部位实现基因过表达,从而建立PD大鼠模型,并从行为学(ethology)及组织病理、生化角度对该模型进行评价。
       雌性8周龄wistar大鼠64只,体重200~250g;根据注射的不同种病毒分为A/B/C/D共4组,每组16只。每组按照递增的注射剂量分为Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ/Ⅳ四组,每种剂量注射4只。注射后2周,4周时各处死2只进行切片免疫组化成像。结果表明,Ⅳ组表达效果更好。注射后第4,7,10,12周进行走步实验和上肢放置实验等行为学检测,结果表明模型构建成功。

       Fig.1A.注射GT-0069 SYN-EGFP病毒2w、4w后的免疫组化成像;B.注射GT-0070 SYN-SNCA(WT)病毒2w、4w后的免疫组化成像;C.注射GT-0071 SYN-SNCA(1)病毒2w、4w后的免疫组化成像;D.注射GT-0072 SYN-SNCA(2)病毒2w、4w后的免疫组化成像。
       随后再进行行为学检测实验。对四组大鼠右侧黑质注射同一剂量4种病毒,注射后第4,7,10,12周进行走步实验和上肢放置实验等行为学检测,结果表明模型构建成功(Fig. 2)。

       Fig.2A.大鼠走步实验数据统计。其中70组为注射SNCA野生型(WT),71组为突变型1,72组为突变型2,69组为EGFP对照组。分别对应注射的病毒编号为GT-0069,GT-0070,GT-0071和GT-0072。B.大鼠上肢放置实验数据统计。

我司优势
◆靶向特异脑区。
◆可以在成年动物中进行转基因表达(避免发育阶段中代偿机制的影响)。
◆可以制备不同剂量,不同物种(啮齿动物,非人灵长类动物均可)和不同基因组合的疾病模型。
◆有时间依赖性的神经病理改变(神经炎症放大和细胞质内含物)。

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神经环路示踪病毒载体、基因编辑(敲入、敲除、点突变、敲低)、基因过表达/干扰服务、行为学小鼠模型构建、干细胞诱导分化、整包服务等。
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